在《荧光显微镜如何激发荧光的？》一文中我们曾经介绍了荧光显微镜的荧光激发原理，今天小编说说荧光显微镜激发光波长。

荧光显微镜是利用一个高发光效率的点光源，经过滤色系统发出一定波长的光(如紫外光3650入或紫蓝光4200入)作为激发光、激发标本内的荧光物质发射出各种不同颜色的荧光后，再通过物镜和目镜的放大进行观察。

这样在强烈的对衬背景下，即使荧光很微弱也易辨认，敏感性高，主要用于细胞结构和功能以及化学成分等的研究。荧光显微镜的基本构造是由普通光学显微镜加上一些附件(如荧光光源、激发滤片、双色束分离器和阻断滤片等)的基础上组成的。

荧光光源——般采用超高压汞灯(50一200W)，它可发出各种波长的光，但每种荧光物质都有一个产生最强荧光的激发光波长，所以需加用激发滤片（一般有紫外、紫色、蓝色和绿色激发滤片），仅使一定波长的激发光透过照射到标本上，而将其他光都吸收掉。每种物质被激发光照射后，在极短时间内发射出较照射波长更长的可见荧光。荧光具有专一性，一般都比激发光弱，为能观察到专一的荧光，在物镜后面需加阻断(或压制)滤光片。它的作用有二：一是吸收和阻挡激发光进入目镜、以免于扰荧光和损伤眼睛，二是选择并让特异的荧光透过，表现出专一的荧光色彩。两种滤光片必须选择配合使用。

常见问题：

1.荧光显微镜的汞灯发出的是广谱激发波长，是不是已经涵盖了所有波长不需要再调了？

没有覆盖所有波长、有全光谱光源，通常使用的是100W 50W的汞灯为光源。

2.荧光高压汞灯使用寿命大概多久？

超高压汞灯(HBO)发光时,泡内产生50～70个标准大气压,它的引燃电压很高,工作时维持电压较低,约为50V～60V,电丝电流在4A左右,灯的寿命与启动次数和工作时间有关。启动次数愈多,每次工作时间愈短,寿命愈短。德国莱茨公司规定每启动一次工作3h,共启动70次为准,平均寿命为200h；日本奥林巴斯公司平均寿命是400h。使用中,当灯泡变黑或达规定时间应调换灯泡 ,否则除了灯的光度下降外,而且还有可能出现爆炸事故。熄灭时一般约15分钟方完全冷却,在未完全冷却时,切勿打开灯室,因热灯泡内压力很大,聚冷会引发爆炸。因此需要严谨使用，部分实验室会要求统计使用时间 ，填写记录以保证安全。