细菌抹片标本的制备
技术支持1.抹片 根据所用材料不同,抹片的方法亦有差异
(1)固体培养物
用经酒精灯火焰烧灼灭菌后的接种环,蘸取无菌蒸馏水(无菌肉汤、生理盐水均可)一环于清洁无油脂的载玻片中央,再钩取细菌的固体接着物少许混于蒸镏水中,涂抹成直径为1—1.5cm大小的均匀菲薄的抹片。
(2)液体培养物
可直接用灭菌接种环钩取细菌培养液1.2环,涂抹于玻片上即可。但应注意净管底Iili物摇匀,以免影响涂片效果。
(3)组织涂片
用灭菌的剪刀镊子取被检组织一小块,以其断面在玻片上压印或涂抹成适当大小的薄片。如为肝脾组织,脓汁、血液、乳汁等可直接涂抹于玻片上。无论何种方法,切忌
2.干燥 将抹片置于空气中让其自然干燥
3.固定 固定的方 法因材料不同而异:
(1)火焰固定
细菌培养物抹片,常采用火焰固定法,即将已干燥的抹片菌膜面向上,以钟摆速度在酒精灯火焰上通过数次(用手背触及抹片反面,以不烫手为宜)。
(2)化学固定
血液、组织等抹片常用此法固定,即以数滴甲醇滴加在玻片上,固定3.5min。
抹片经固定后便粘附于玻片上而不易被水冲掉,并能改变细菌对染料的通透性,增加与染料的亲和力而更容易着色,同时多数细菌能被杀死。